ELISA測定的陽性判斷值,通常是將大量陰性和陽性人群的測定數據進行統計分析后確定的,其確定依據為判斷結果的假陽性和假陰性率低。在陽性判斷值周圍一定范圍內之外的測定結果可歸為可疑,亦即ELISA測定的“灰區”。“灰區”的大小可用統計學方法確定。測定結果處于“灰區”的樣本,可通過確認試驗或追蹤檢測來確定到底是陽性還是陰性ELISA“灰區”是把定量分析的正常值范圍引入定性分析而建立的概念。
ELISA試劑盒在實際應用的過程中，得通過不同的設計，不好走和方法都是有很多種類的，像是接法、競爭法、雙位點一步法、捕獲法測IgM抗體、應用親和素和生物素的ELISA。今天小編就跟大家講講ELISA方法設計都有哪些原理？
ELISA試劑盒以免疫學反應為基礎，將抗原、抗體的特異性反應與酶對底物的催化作用相結合起來的一種敏感性很高的試驗技術。由于抗原、抗體的反應在一種固相載體-聚苯乙烯微量滴定板的孔中進行，每加入一種試劑孵育后，可通過洗滌除去多余的游離反應物，從而保證試驗結果的特異性與穩定性。
應用雙抗體夾心法測定標本水平。用純化的抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入，再與HRP標記的抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經過*洗滌后加底物TMB顯色。
ELISA試劑盒TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品的濃度。
更新時間：2019-05-28
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