產(chǎn)品簡介：

GUS(β-Galactosidase)基因是存在于 E.coli 等一些細(xì)菌基因組內(nèi)的編碼β-葡萄糖苷酸

酶的一種水解酶，該基因常作為融合標(biāo)記用于植物轉(zhuǎn)基因分析和調(diào)控研究中。GUS 受體基

因系統(tǒng)有表達(dá) E.coli GUS 酶的穩(wěn)定性和在植物內(nèi)的低活性，絕大多數(shù)植物沒有檢測到葡萄

糖苷酸酶的背景活性，以β-葡萄糖苷酸酯類物質(zhì)為底物，其反應(yīng)產(chǎn)物可用多種方法檢測出來。

5-Bromo-chloro-3-indolyl β-D-glucuronide，cyclohexylammonium salt(簡稱為

X-Gluc 或 X-GlcA)分子量為 521.8，CAS 號為 18656-96-7，是檢測大腸桿菌中 GUS 基因

的底物，可快速檢測植物中 GUS 基因融合標(biāo)記。

GUS 染色液(即用型)又稱β-葡萄糖苷酶基因染色試劑盒(β-Galactosidase

Reporter Gene Staining Kit)簡稱為 GUS 染色液，其染色原理是適宜的反應(yīng)條件下β-葡萄

糖苷酶(GUS)可將 X-Gluc 水解成藍(lán)色物質(zhì)，該物質(zhì)不溶解于轉(zhuǎn)基因的細(xì)胞核組織中的靛藍(lán)

物質(zhì)，具有 GUS 活性的部位或位點呈現(xiàn)藍(lán)色或藍(lán)色斑點，可用肉眼或顯微鏡觀察到，GUS

染色液可用于生物化學(xué)活性分析、免疫分析以及組織和細(xì)胞的組織化學(xué)染色，多用于轉(zhuǎn)基因

植物的 GUS 基因表達(dá)分析，該即用型試劑比常規(guī) GUS 染色液操作簡便。該試劑僅用于科

研領(lǐng)域，不適用于臨床診斷或其他用途。

產(chǎn)品組成：

名稱                                           50ml            100ml

試劑(A): X-Gluc                         1 支             2 支 

試劑(B): X-Gluc Solution          1ml             2×1ml 

試劑(C): GUS Buffer                   50ml          100ml 

使用說明書                             1 份

自備材料：

1、 70%乙醇

2、 去離子水

3、小瓶或多孔板、顯微鏡

GUS 染色液（即用型）操作步驟(僅供參考)：

1、配制 X-Gluc 溶液(50x)：取 1ml X-Gluc Solution *加至 1 支 X-Gluc 中，充分溶解，

即獲得 X-Gluc 溶液(50x)。配制好的 X-Gluc 溶液(50x)-20℃保存，1 個月有效。

2、配制 X-Gluc 染色液：取適量的 X-Gluc 溶液(50x)和 GUS Buffer，按 1：49 比例充分

混勻，配制成 X-Gluc 染色液，如取 0.2ml X-Gluc 溶液(50x)加入到 9.8ml GUS Buffer 中，

即配成 10ml GUS 染色液，該染色液現(xiàn)用現(xiàn)配，短期貯存可以 4℃保存 3 天。

3、取適量待染葉片等組織加入適量 GUS 染色液使其*浸沒組織。

4、37℃孵育 1~24h，隨著孵育時間的延長，藍(lán)色漸漸出現(xiàn)，當(dāng)表達(dá)量較高時 GUS 活性的

部位或位點呈現(xiàn)藍(lán)色或藍(lán)色斑點。

5、用 70%乙醇脫去樣本的葉綠素，一般樣本浸沒于乙醇 1～3h，至陰性對照呈白色。如有

必要可重復(fù)該脫色步驟，以便*清除葉綠素；樣本保存于乙醇中，可用肉眼或普通光學(xué)顯

微鏡下觀察，白色背景上的藍(lán)色即為 GUS 表達(dá)位點。

注意事項：

1、 GUS 染色液冰上配制，可以 4℃避光保存 3 天。

2、 由于組織特異性等原因，藍(lán)色顏色反應(yīng)可能不*一致，應(yīng)注意摸索具體實驗條件。

3、 擬南芥的根、花和葉片以及煙草幼苗根就可直接染色；煙草和馬鈴薯這些植物的莖和葉

須在染色前切成薄片(1~3mm)。

4、 當(dāng)操作大的組織和樣品時可以選用真空滲入法來幫助底物和酶滲入細(xì)胞，建議采購常規(guī)

GUS 染色液(DP0011)。

5、 GUS 染色液(即用型)染色靈敏度較好，但有時會出現(xiàn)非特異性反應(yīng)(即假陽性)，如非特

異性反應(yīng)較明顯，建議采購常規(guī) GUS 染色液(DP0011)。

GUS 染色液（即用型）有效期： 6 個月有效。